摘要：高效液相测定法（HPLC）是当前测量物质浓度的常用方法之一，而作为活性较高的化合物，NMN是被广泛研究的物质之一。本文将从四个方面阐述高效液相测定法在测量NMN中的应用，包括NMN的背景、HPLC原理、HPLC测量NMN的操作步骤及考虑因素和优缺点。最后，对文章进行总结归纳，为NMN的研究提供参考。

1、NMN的背景

NMN，即尼古丁酸单核苷酸，是存在于人体细胞中的一种化合物，在细胞内重要的功能是促进NAD+的合成，进而调节机体的生理代谢状态。NMN的研究日益受到关注，有着广泛的临床应用前景，涉及抗衰老、治疗代谢疾病等多个方面。因此，研究NMN的测量方法对于后续的研究工作以及NMN的应用都具有重要意义。

2、HPLC原理

HPLC是指通过洗选柱和样本间质量分数分离和分析的分离技术。未考虑液体底物的HPLC称作正相液相色谱，考虑液体底物的HPLC称作反相液相色谱。

反相HPLC原理如下：如果平衡相为纯水，而流动相是由甲醇和水按一定比例混合的混合溶液（甲醇功率宽度增大，使分子互相作用的力更大），这时被测物能够被吸附在固定相上，而溶于流动相中。根据样品吸附强度大小和溶剂对物质的影响量的不同，即可分离被测物，达到检测的目的。

在HPLC测量NMN时，反相HPLC被广泛应用。反相HPLC色谱柱一般使用C18柱，作为固定相，流动相一般为醋酸铵-乙腈，保证有效地保留NMN。

3、HPLC测量NMN的操作步骤及考虑因素

（1）操作步骤

提取NMN后，需要进行样品的预处理，包括离子对交换（IP）层析纯化，胶体金固定颗粒层析纯化等，以提高样品纯度。然后，将提取样品通过HPLC进样器注入流动相中，等待样品分离并且检测红外光谱图像，根据检测结果计算出样品中的NMN含量。

（2）考虑因素

考虑因素包括测量NMN的波长、检测器选择、分离重复性等。

4、HPLC测量NMN的优缺点

（1）优点

①高效液相色谱技术稳定可靠，峰形对称，分离效果好，适用样品范围广。

②提取NMN时，可选择性地进行纯化，保证检测的精度和准确性。

（2）缺点

①操作较为繁琐，需要先进行样品的预处理

②HPLC仪器设备价格较为昂贵，限制了其在分析实验室的普及。

综上所述，本文分析了高效液相测定法在测量NMN时的应用，包括NMN的背景、HPLC原理、HPLC测量NMN的操作步骤及考虑因素和优缺点，并赋予读者一定的研究意义。NMN的研究热度不断升温，希望本文对于对此感兴趣的读者提供帮助。

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